使用BIACORE ProteinA芯片检测抗体与抗原结合的动力学ka、kd和亲和力数据KD。本实验使用的抗体为抗人源B2微球蛋白的鼠单抗，分子量约为150KD；抗原为人源B2微球蛋白，分子量为11.8KD。本实验采用Protein A芯片以捕获法的方式固定抗体，抗原作为分析物检测其余抗体结合的动力学和亲和力数据。
一、实验使用机型、试剂盒耗材
1、本实验所用的机型：Biacore T200。
2、使用芯片：Protein A芯片。Protein A芯片可以捕获许多哺乳动物源的抗体，包括人源IgG1、IgG2、IgG4等。只结合抗体Fc区重链，不结合抗体Fab段，保证了抗体结合的定向性。购自GE Healthcare。
3、缓冲液：10 × PBS-P +，购自GE Healthcare。
4、去离子水（用0.22μm 膜过滤过）。
5、配体：抗人源B2微球蛋白的鼠单抗，母液浓度为1mg/ml。
6、分析物：人源B2微球蛋白，母液浓度为85μM。
7、其他耗材：无盖1.5ml EP管，96孔板，购自GE Healthcare。
二、实验步骤
（一）开机
操作视频
（二）样品稀释
1、运行缓冲液：本实验缓冲液选用的是HBS-EP+，将10ꓫHBS-EP+（pH7.4）用去离子水稀释10倍，至少配制200mL。根据实验不同调整缓冲液的配制量。
2、配体浓度：用运行缓冲液将抗体溶液稀释至0.5μg/ml，400μL（至少保证1:20的稀释比）。
3、分析物浓度：用运行缓冲液将抗原溶液分别稀释为：32nM，16nM，8 nM，4 nM，2 nM。
（三）样品检测
本实验采用的配体偶联为捕获偶联的程序偶联法，偶联程序和样品测试程序在一起。在运行程序之前需要进行配体偶联量的调试工作。调试工作采用手动运行的模式进行。（操作视频）
（四）、数据分析
本实验采用动力学分析。
（操作视频）
（五）关机
操作视频
