利用Biacore 检测蛋白与糖结合的亲和力数据KD。本实验采用CM5芯片偶联蛋白，糖分子作为分析物检测结合的亲和力。
一、实验使用机型、试剂和耗材
1、本实验所用的机型：Biacore T200 。
2、传感芯片：CM5 芯片。购自为 GE Healthcare。
3、氨基偶联试剂盒：购自为 GE Healthcare。
4、缓冲液：10 x HBS-EP+，10×PBS-P+pH 7.4，购自为 GE Healthcare。
5、去离子水（0.22 μm 膜过滤）。
6、配体蛋白：分子量为24kD，如果为商业化蛋白粉末，用水稀释到 200 μg/ml，分装在 -20℃保存。提前确定蛋白的活性，在进行溶解时，确保溶解液不含Tris 等带有伯氨基团的成分。
7、糖：母液浓度为1mM，样品体积在 200 μL 以上，纯度>90%。
8、再生溶液 Glycine 1.5 ，Glycine 2.0，Glycine 2.5，Glycine 3.0，购自为 GE Healthcare。
9、其他耗材： 1.5 ml EP 管，96孔板。

注意：
1、因糖类折光率高，故只有较强结合力的糖类分子才适用于本SOP。
2、此次实验结果为1.45×10-5 M，最终的亲和力结果根据样品不同有所不同。