利用Biacore SA芯片检测核酸与蛋白结合的动力学数据ka、kd和亲和力数据KD。本实验使用的核酸为Lactosenatural operator O1（乳糖操纵序列O1，Lac O1），由23对互补碱基构成的双链DNA，DNA的5’端带有生物素化标签（5’-biotin-GAATTGTGAGCGGATAACAATTT-3’）[1]，分子量约为14.5KD；蛋白为大肠杆菌Lactose operon repressor（乳糖操纵阻抑蛋白，Lac I），分子量为39.4 KD。本实验利用SA芯片固定生物素化修饰的Lac O1双链DNA，Lac I蛋白作为分析物检测其结合的动力学和亲和力数据。
一、实验使用机型、试剂和耗材
1、本实验所用的机型：Biacore T200 。
2、S系列SA芯片。购自为 GE Healthcare。
4、去离子水（用0.22μm膜过滤）。
5、生物素化修饰的核酸配体Lac O1：商业化合成的粉末，用水稀释到100μg/ml，分装保存在-20℃。对合成的核酸需要确认碱基组成和核酸的完整性，以及生物素化修饰的比例和纯度（本实验使用的生物素化修饰核酸由金唯智生物技术有限公司合成）。注：核酸的空间二级或三级结构可能对分析物的结合是至关重要的（如DNA、RNA适配体，双链DNA等），需要采用加热变性和缓慢冷却复性来保证核酸的结合活性。
6、Lac I蛋白分析物：母液浓度至少为10 uM，样品体积在50μL以上，纯度>90%。在选择蛋白供应商时，客户需要确认蛋白的活性，本实验使用了Novoprotein, #CG57。
7、其他耗材：无盖1.5 ml EP管，96孔板，购自为 GE Healthcare。