本实验利用 Biacore T200 检测蛋白与蛋白结合的亲和力数据KD。采用 CM5芯片偶联蛋白 A，蛋白B作为分析物检测结合的亲和力。蛋白A分子量为24kD，蛋白B分子量为21kD。

一、实验使用机型、试剂和耗材

1、本实验所用的机型：Biacore T200 。

2、传感芯片：CM5 芯片。

3、氨基偶联试剂盒：购自为 GE Healthcare。

4、缓冲液：10 x HBS-EP+，购自为 GE Healthcare。

5、去离子水（0.22 μm 膜过滤）。

6、配体蛋白A：分子量为24kD，如果为商业化蛋白粉末，用水稀释到 200 μg/ml，分装在 -20℃保存。提前确定蛋白的活性，在进行溶解时，确保溶解液不含Tris 等带有伯氨基团的成分。

7、流动相蛋白B：母液浓度为1mM，样品体积在 200 μL 以上，纯度>90%。

8、再生溶液 Glycine 1.5 ，Glycine 2.0，Glycine 2.5，Glycine 3.0，购自为 GE Healthcare。

9、其他耗材： 1.5 ml EP 管。