1. 取得优质ITC 数据的几个关键步骤 ：

（1）质量好的样品状态

（2）干净的样品池和良好的仪器性能

（3）准确的样品浓度和正确的样品匹配

（4）符合要求的样品浓度、比例和最低放热量

2.样品池的清洗顺序：

（1）去离子水清洗2-3次

（2）14% Decon-90溶液清洗

（3）14% Decon-90溶液60⁰C高温泡洗4小时

（4）若前面所有方法均不奏效，可使用次氯酸钠+氢氧化钠清洗

（5）做水滴水实验检测样品池是否清洗干净

3.蛋白质样品的准备：

（1） 选择合适的透析蛋白或者置换蛋白的缓冲液

（2） 准确的测量蛋白浓度，尽量使用A280方法

（3） 确保样品池和滴定针中的背景溶液完全匹配

4.缓冲液的选择：

（1）缓冲体系的pH范围2-12, 绝大部分添加剂可以使用

（2）对于有机溶剂，请检查参考样品池材质Hastelloy合金的化学耐受表

（3）去垢剂浓度需要低于去垢剂的临界胶束浓度CMC (除非研究对象就是胶束)

i. 避免使用DTT

ii. 尽量使用β巯基乙醇和TCEP(一种很强的还原剂）

iii. 如果需要添加较粘的添加剂，如甘油，尽量控制在最低浓度

5.蛋白质样品制备的技术

(1)澄清：移除样本中的颗粒物质（细胞碎片，聚集蛋白质等等）例如：离心、微滤等

（2）缓冲液交换和脱盐：凝胶过滤（GF）、超滤(UF)、蒸发 、透析、沉淀析出、SDS-PAGE、凝胶电泳、2-D电泳、固相萃取等

（3）样品清洗和浓缩：样品的清洗用于蛋白质溶液里清除去污剂、配体、多糖、核酸、和苯酚等杂质。通常与蛋白质萃取紧密结合。如：核酸移除：添加核酸酶。样品浓缩：超滤、沉淀、SPE（固相萃取）、和蒸发等。