使用ITC测定环糊精与硫酸对甲酚的结合常数

环糊精和硫酸对甲酚的相互作用符合常规的主客体作用模式。

环糊精是一类中空杯装的分子，其特殊的构型使得其外侧具有亲水性，同时内部为疏水环境。由于硫酸对甲酚具有疏水性的芳香环结构，在水溶液中，芳香环结构更倾向于进入疏水的环糊精空腔中，形成稳定的复合物。

样品的准备：

精确称量环糊精，将其溶于5 mL水中，超声分散30 min；

精确称量硫酸对甲酚，将其分散于5 mL水中，超声分散30 min；

准备约100 mL超纯水，过膜，用于清洗ITC设备；

将环糊精和硫酸对甲酚溶液分别通过针头滤器（0.22 um）过滤，除去不溶的固体颗粒；

反应条件：

Total & Injections：20

Cell Temperature(⁰C.)：25

Reference Power(µcal/sec.):10

Initial Delay (sec.):60

Syringe Concentration (mM):0.1

Cell Concentration (mM):0.01

Stirring Speed (RPM):1000

Injection Parameters

实验结果：

注意事项：

注射器中样品浓度可设为样品池中浓度的10倍，并非强制要求，可以按照实际情况具体调整；

由于ITC所需样品很少，而称量样品时，天平存在一个固定的误差，因而称量样品越多，最终获得的样品浓度越可靠，因而样品称取时建议配置成母液，在使用时稀释至工作浓度；

ITC主要测定的是作用过程的吸放热，因而在正式试验之前建议进行预实验摸索最佳的实验浓度，进而提高实验的成功率与准确性；

实例中的水并不是强制要求，使用buffer应针对不同的实验，合理选择；

同时不同溶剂在彼此滴定的过程中可能存在放热的现象，因而溶解主客体溶质的时候尽可能使用同一批次的同一种buffer，若操作中无法实现使用相同的buffer，则可以考虑增加只含有buffer的空白滴定，在后期扣除背景；